工具酶总结 第1篇

GlySERIAS是一种特异性酶切G4S柔性Linker或PolyG的酶，可以用于表征多功能蛋白结构域的融合蛋白。最近做的一个项目就使用了该酶进行表征，用来推测linker两端的蛋白结构域的翻译后修饰。这个酶比GinsKHAN还贵，2000u一万多块钱，用的我肉疼。

肽图分析用酶

肽图分析是根据蛋白质分子量大小及氨基酸组成特点，使用专一性较强的蛋白水解酶作用于特定的位点将蛋白裂解成多个小片段，通过一些分离手段形成特征性指纹图谱，是治疗性抗体及融合蛋白等一级结构鉴定的“金标准”方法。

下表中列出了常见肽图分析用酶的酶切位点及优缺点，供参考。

参考文献：

M, Khalili H. Soluble Papain to Digest Monoclonal Antibodies; Time and Cost-Effective Method to Obtain Fab Fragment. Bioengineering (Basel). 2022 May 12;9(5):209. doi: . PMID: 35621487; PMCID: PMC9137653.

工具酶总结 第2篇

PNGase F(肽N-糖苷酶F)是一种酰胺水解酶，主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。PNGase F可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖及杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间的酰胺键，同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。PNGase F不会去除常见植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 岩藻糖连接的寡糖。

工具酶总结 第3篇

3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非结构蛋白的关键酶，在病毒复制过程中发挥着重要作用。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特异性，能特异切割位于Gln-Gly之间的肽键，识别位点为 Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro。xxx生物将人鼻病毒3C蛋白酶的编码区基因在大肠杆菌中进行表达，纯化后获得了高纯度的重组3C蛋白酶，该蛋白酶能特异切割含有3C酶切位点的融合蛋白，具有良好的生物学活性。同时，xxx生物自产的3C蛋白酶融合有GST标签蛋白，有利于后期将其从酶切体系中去除。

SUMO Protease

SUMO蛋白酶识别完整的含100个氨基酸的SUMO（Small Ubiquitin-like Modifier）标签蛋白，并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比，由于其识别序列长，所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性，且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力，例如温度（4-37℃）等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签，便于使用亲和层析的方法，去除SUMO蛋白酶，纯化目的蛋白。本产品经验证在 TBS pH 和 PBS pH 反应体系中均可使用。